小伙伴们关心的问题:浓缩胶和分离胶分别发挥的作用,或者浓缩胶和分离胶分别发挥的作用是什么的知识,本文通过数据整理汇集相关信息,希望对各位有所帮助。

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浓缩胶(积沉胶)和分离胶有什么区别?各自在电泳中的作用是什么?

我的一点感受,浓缩胶和分离胶的PH值不同,前者主要表现为浓缩效用,后者表现为电荷效用和分子筛效用。

浓缩效应主要在浓缩胶中完成,浓缩胶的pH6.8,在这个pH条件下,缓冲液中的HCl的Cl离子几乎全部解离,Gly的等电点为6.0,仅少数解离为负离子,在电场中移动速度很慢。酸性蛋白质在此pH下解离为负离子,三类离子的迁移速率为Cl一般蛋白质Gly,电泳开始后,Cl离子泳动快,在其后留下一个低离子浓度区。Gly在电场中移动很慢,造成移动离子的缺乏,于是快慢离子间就形成了一个缺少离子的高压区,在高压区内所有的负离子都会加速移动,当移到Cl离子区域时,高电压消失,蛋白质的移动速度慢下来,当以上稳定状态建立后,蛋白质样品在快慢离子间被浓缩形成一个狭小的之间层,并按蛋白质所带负电荷量的多少依次排列成带,浓缩样品,从浓缩胶进入分离胶后,胶的pH升高,Gly的离解度增大,泳动率上升,又因为它分子小,故超过所有的蛋白质分子,紧跟在Cl离子后,Cl离子迁移后,低离子浓度不再存在,形成了恒定的电场强度,因此,蛋白质样品在分离胶中的分离主要取决于它的电荷性质,分子大小和形状,分离胶的孔径有一定大小,对不同相对质量的蛋白质来说,通过时收到的滞阻作用不同,即使静电荷相等的颗粒,也会由于这种分子筛的效应,把不同大小的蛋白质相互分开。

浓缩胶和分离胶分别发挥的作用。

你是说的在SDS-PAGE里面吧,

浓缩胶

的浓度比较低(5%丙烯酰胺-甲叉双丙烯酰胺),里面的

孔径

也比较大,所有的

蛋白

都能够在进入

分离胶

之前在同一水平线上(因为在你加样的时候蛋白是分布在加样

孔中

的,不在同一水平线上,就像运动员都不在起跑线上一样,无法比较)。

分离胶的胶浓度比较大(10%),里面胶孔径也比较小,这样施加

电压

的时候小的蛋白可以穿过孔跑到下面去,而分子量大的蛋白就可能被拦住,就跑的慢。通过这种方式以分子量大小的区别来分离

蛋白质

如果你对sds-page详细的原理有兴趣或者不清楚的地方欢迎追问~

浓缩胶和分离胶有什么区别

浓缩胶和分离胶的ph值不同,前者主要表现为浓缩效用,后者表现为电荷效用和分子筛效用。

浓缩效应主要在浓缩胶中完成,浓缩胶的ph6.8,在这个ph条件下,缓冲液中的hcl的cl离子几乎全部解离,gly的等电点为6.0,仅少数解离为负离子,在电场中移动速度很慢。酸性蛋白质在此ph下解离为负离子,三类离子的迁移速率为cl一般蛋白质gly,电泳开始后,cl离子泳动快,在其后留下一个低离子浓度区。gly在电场中移动很慢,造成移动离子的缺乏,于是快慢离子间就形成了一个缺少离子的高压区,在高压区内所有的负离子都会加速移动,当移到cl离子区域时,高电压消失,蛋白质的移动速度慢下来,当以上稳定状态建立后,蛋白质样品在快慢离子间被浓缩形成一个狭小的之间层,并按蛋白质所带负电荷量的多少依次排列成带,浓缩样品,从浓缩胶进入分离胶后,胶的ph升高,gly的离解度增大,泳动率上升,又因为它分子小,故超过所有的蛋白质分子,紧跟在cl离子后,cl离子迁移后,低离子浓度不再存在,形成了恒定的电场强度,因此,蛋白质样品在分离胶中的分离主要取决于它的电荷性质,分子大小和形状,分离胶的孔径有一定大小,对不同相对质量的蛋白质来说,通过时收到的滞阻作用不同,即使静电荷相等的颗粒,也会由于这种分子筛的效应,把不同大小的蛋白质相互分开。

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总结:浓缩胶和分离胶分别发挥的作用和浓缩胶和分离胶分别发挥的作用是什么的介绍到此就结束了,感谢您的支持。

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